化学发光免疫分析技术(Chemiluminescence immunoassay,CLIA)是由 Halman 等[1]在 1977 年提出的,CLIA 结合了高敏感性的化学发光反应系统和高特异性的免疫反应系统, 是当前应用最为广泛的一种分析技术方法[2]。 CLIA 以化学发光剂为示踪物直接标记抗原或抗体进行免疫测定。 目前化学发光免疫分析技术主要可以分为化学发光酶免疫分析(Chemiluminescence enzyme immunoassay,CLEIA)、化学发光标记免疫分析 (Chemiluminescence labeling,CLL)及电化学发光免疫分析(electrochemiluminescence,ECL)三种类型[3]。 CLIA 具有高灵敏度、选择性好、检测范围广、反应速度快、分析时间短、操作简单、可实现自动化等特点[4]。 40 年来CLIA 飞速发展,已经在生命科学研究、药物分析、医学临床研究、食品分析检测、 动物医学和环境治理等研究领域得到了广泛的应用,取得了很多重要的研究成果[5]。
化学发光免疫分析技术的基本原理是利用化学发光反应的发光剂或催化剂等示踪物标记抗原或抗体, 被标记的抗原或抗体与被检测物发生一系列的免疫反应,经过离心、洗涤等理化步骤后,通过测定发光强度的形式来对待测物进行定量[6]。 CLIA 是化学发光法和免疫分析法的结合产物, 以其高灵敏度和高特异性的特点不断丰富着人类对科学技术及研究领域的新认识。 本文现收集近年来关于CLIA 相关研究的成果, 对该技术的研究及应用进展进行分析,希望在这人类科学技术飞速发展的时期,能够促使CLIA 在疾病研究领域有更好的发展前景, 帮助解决更多的问题。
1 CLIA 在医学上的应用
乙肝病毒(HBV)具有较强的传染性,危害较大,因此对乙肝患者的检出准确率也要求较高。 吴晓红等[7]在HBV 血清学检验中采用CLIA 和ELISA 两种方法进行检测,探讨分析对比两种方法的检测结果。试验中共检测了126 例疑似乙肝患者, 分别检测患者血清中的 HBeAg、HBsAg、HBeAb、HBcAb、HBsAb五项指标,分析对比两种方法的检出率。 结果显示,CLIA 对HBsAg 和HBeAb 两项指标的检出率显著高于ELISA,其他指标不存在显著性差异(P>0.05)。这说明对于HBV 的血清学检验,CLIA 比ELISA 具有更高的特异性和敏感性, 能够提高临床检验的准确性, 更适合用于HBV 的早期诊断及病情动态监测。 同样,房丽娜[8]在乙肝病毒研究中也得出了相同的结论,CLIA 检测阳性率高达96.7%, 而ELISA 的检测阳性率仅有78.7%,存在显著性差异(P<0.05)。
梅毒是一种具有传染性的慢性系统性疾病,可引起心脑血管系统及神经系统等多系统受损, 甚至扩散至全身。 近年来,梅毒病例逐年上涨,因此,早期诊断对梅毒的控制传播尤为重要[9]。 张艳奇[10]将CLIA 法与梅毒螺旋体颗粒凝集试验(TPPA)联合用于筛选疑似梅毒患者, 经CLIA 初检后的127 例阳性患者, 结合 TPPA 法复检后阳性符合率为96.77%,说明CLIA 法与TPPA 法联合使用可提高疑似梅毒患者的阳性确诊率,降低误诊率和漏诊率。何宝明等[11]使用 CLIA 法、ELISA 法和 TPPA 法检测献血者梅毒螺旋体特异性抗体,王勤[12]使用CLIA 法、TPPA 法和甲苯胺红不加热血清试验法 (TRUST)检测患者血清中的梅毒螺旋体抗原, 均认为CLIA 具有更高的灵敏度和特异度, 且CLIA 法操作较为简单, 对临床上大批量的血液标本检测具有较大的应用价值。
张丽娟等[13]、吕志文等[14]采用CLIA 法和免疫印迹法(LIA)来检测人体自身抗干燥综合征的抗原A(SSA)和抗原 B(SSB)的抗体,并用 ELISA 法加以验证, 以此来评价CLIA 的临床应用价值。 一致认为CLIA 法与LIA 法的检测结果具有较高的一致性,与LIA 法和 ELISA 法相比,CLIA 法操作简单、 随机上样、真正的全自动且实现了真正的定量,更加适合临床上抗SSA 和SSB 的抗体检测。
艾滋病可导致人体发生严重的免疫缺陷, 一旦患病,治愈概率极低,死亡率较高。近年来,艾滋病的发病率呈现上升趋势, 但目前临床上尚无有效的治疗药物和疫苗,所以及早确诊控制是唯一有效途径,故艾滋病的临床快速筛查方法的建立变得尤为重要。 Zhao H[15]和宋超等[16]用多种方法对HIV 抗体进行检测, 对比分析各种方法的灵敏度, 结果显示,CLIA 法具有较高的灵敏度和特异性。
CLIA 法在医学研究上已经得到了广泛的应用,除了上述这些例子外, 还有很多疾病的诊断治疗都运用到了CLIA 法, 比如原发性胆道胆管炎特异性抗体的检测[17]、肺炎支原体抗体的检测[18]、变应性鼻炎的诊治[19]、流感病毒[20]、肿瘤标志物检验[21]、育龄妇女风疹病毒的检测[22]等。 CLIA 法的应用日益广泛,为医学研究和疾病诊治提供了一种可靠的技术手段。
文章来源:《医学食疗与健康》 网址: http://www.yxslyjkbjb.cn/qikandaodu/2021/0330/920.html
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